1. سیل کلچر کیا ہے؟
سیل کلچر سے مراد جانوروں یا پودوں سے خلیوں کو ہٹانا اور پھر انہیں سازگار مصنوعی ماحول میں بڑھانا ہے۔خلیوں کو براہ راست بافتوں سے لیا جا سکتا ہے اور کلچرنگ سے پہلے انزیمیٹک یا میکانیکل ذرائع سے توڑا جا سکتا ہے، یا وہ قائم شدہ سیل لائنوں یا سیل لائنوں سے اخذ کیے جا سکتے ہیں۔
2. بنیادی ثقافت کیا ہے؟
پرائمری کلچر سے مراد کلچر کا مرحلہ ہے جب خلیات بافتوں سے الگ ہو جاتے ہیں اور مناسب حالات میں پھیلتے ہیں جب تک کہ وہ تمام دستیاب ذیلی جگہوں پر قبضہ نہ کر لیں (یعنی سنگم تک پہنچ جائیں)۔اس مرحلے پر، خلیوں کو ایک نئے کنٹینر میں منتقل کر کے ان کی ذیلی ثقافت کی جانی چاہیے تاکہ وہ مسلسل ترقی کے لیے مزید جگہ فراہم کر سکیں۔
2.1 سیل لائن
پہلی ذیلی ثقافت کے بعد، بنیادی ثقافت کو سیل لائن یا سبکلون کہا جاتا ہے۔بنیادی ثقافتوں سے اخذ کردہ سیل لائنوں کی عمر محدود ہوتی ہے (یعنی وہ محدود ہیں؛ نیچے دیکھیں)، اور جیسے جیسے وہ گزرتے ہیں، سب سے زیادہ نمو کی صلاحیت والے خلیات حاوی ہو جاتے ہیں، جس کے نتیجے میں آبادی میں جین ٹائپ کی ایک خاص ڈگری فینوٹائپ کے ساتھ متضاد ہوتی ہے۔
2.2 سیل کا تناؤ
اگر سیل لائن کی ذیلی آبادی کو کلوننگ یا کسی اور طریقے سے کلچر سے مثبت طور پر منتخب کیا جاتا ہے، تو سیل لائن سیل سٹرین بن جائے گی۔سیل کے تناؤ عام طور پر والدین کی لائن شروع ہونے کے بعد اضافی جینیاتی تبدیلیاں حاصل کرتے ہیں۔
3. محدود اور مسلسل سیل لائنز
عام خلیات عام طور پر پھیلنے کی صلاحیت کو کھونے سے پہلے صرف ایک محدود تعداد میں تقسیم ہوتے ہیں۔یہ جینیاتی طور پر طے شدہ واقعہ ہے جسے سنسنی کہتے ہیں۔ان سیل لائنوں کو محدود سیل لائنز کہا جاتا ہے۔تاہم، کچھ سیل لائنیں تبدیلی نامی عمل کے ذریعے لافانی ہو جاتی ہیں، جو بے ساختہ ہو سکتی ہیں یا کیمیکلز یا وائرس سے متاثر ہو سکتی ہیں۔جب ایک محدود سیل لائن تبدیلی سے گزرتی ہے اور غیر معینہ مدت تک تقسیم کرنے کی صلاحیت حاصل کرتی ہے، تو یہ ایک مسلسل سیل لائن بن جاتی ہے۔
4. ثقافت کی حالت
ہر خلیے کی قسم کی ثقافت کے حالات بہت مختلف ہوتے ہیں، لیکن خلیات کی ثقافت کے لیے مصنوعی ماحول ہمیشہ ایک مناسب کنٹینر پر مشتمل ہوتا ہے، جس میں درج ذیل چیزیں ہوتی ہیں:
4.1 سبسٹریٹ یا کلچر میڈیم جو ضروری غذائی اجزاء فراہم کرتا ہے (امائنو ایسڈ، کاربوہائیڈریٹس، وٹامنز، معدنیات)
4.2 نمو کے عوامل
4.3 ہارمونز
4.4 گیسیں (O2, CO2)
4.5 ریگولیٹڈ فزیکل اور کیمیائی ماحول (پی ایچ، اوسموٹک پریشر، درجہ حرارت)
زیادہ تر خلیے اینکریج پر منحصر ہوتے ہیں اور انہیں ٹھوس یا نیم ٹھوس سبسٹریٹ (اعتقاد یا مونولیئر کلچر) پر کلچر کیا جانا چاہیے، جب کہ دوسرے خلیے درمیانے درجے (سسپشن کلچر) میں تیرتے ہوئے بڑھ سکتے ہیں۔
5.Cryopreservation
اگر ذیلی ثقافت میں اضافی خلیات ہیں، تو ان کا علاج مناسب حفاظتی ایجنٹ (جیسے DMSO یا گلیسرول) سے کیا جانا چاہیے اور جب تک ان کی ضرورت نہ ہو -130°C (کریوپریزرویشن) سے کم درجہ حرارت پر ذخیرہ کیا جائے۔ذیلی ثقافت اور خلیوں کی کریوپریزرویشن کے بارے میں مزید معلومات کے لیے۔
ثقافت میں خلیات کی مورفولوجی
ثقافت میں خلیوں کو ان کی شکل و صورت (یعنی مورفولوجی) کی بنیاد پر تین بنیادی زمروں میں تقسیم کیا جا سکتا ہے۔
6.1 فبرو بلوسٹس کے خلیے دو قطبی یا کثیر قطبی ہوتے ہیں، ان کی شکل لمبی ہوتی ہے اور سبسٹریٹ سے جڑے بڑھتے ہیں۔
6.2 اپیٹیلیل نما خلیات کثیرالاضلاع ہوتے ہیں، ان کا سائز زیادہ باقاعدہ ہوتا ہے، اور مجرد شیٹس میں میٹرکس سے منسلک ہوتے ہیں۔
6.3 لیمفوبلاسٹ نما خلیے کروی ہوتے ہیں اور عام طور پر سطح سے جڑے بغیر معطلی میں بڑھتے ہیں۔
7. سیل کلچر کا اطلاق
سیل کلچر سیل اور سالماتی حیاتیات میں استعمال ہونے والے اہم ٹولز میں سے ایک ہے۔یہ خلیات کی عام فزیالوجی اور بائیو کیمسٹری (جیسے میٹابولک ریسرچ، عمر بڑھنے)، خلیوں پر ادویات اور زہریلے مرکبات کے اثرات، اور mutagenesis اور carcinogenic اثرات کا مطالعہ کرنے کے لیے ایک بہترین ماڈل سسٹم فراہم کرتا ہے۔یہ منشیات کی اسکریننگ اور ترقی اور حیاتیاتی مرکبات (جیسے ویکسین، علاج کے پروٹین) کی بڑے پیمانے پر تیاری کے لیے بھی استعمال ہوتا ہے۔ان ایپلی کیشنز میں سے کسی کے لیے سیل کلچر کو استعمال کرنے کا سب سے بڑا فائدہ ان نتائج کی مستقل مزاجی اور تولیدی صلاحیت ہے جو کلون شدہ خلیوں کے بیچ کا استعمال کرتے ہوئے حاصل کیے جا سکتے ہیں۔
پوسٹ ٹائم: جون 03-2019